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免疫细胞能够精准识别并杀伤病毒、细菌等外来入侵者，并执行免疫监视功能，发现和清除体内出现的突变或衰老细胞，维持机体内环境的稳定，保障身体健康。通过流式细胞仪对血液中的免疫细胞进行分析，有助于进行疾病诊断，准确评估免疫功能。在人体内，T细胞介导细胞免疫以杀伤入侵的病原体；B细胞能通过产生抗体发挥特异性体液免疫功能；NK细胞发挥着重要的抗肿瘤、抗病毒感染的作用；DC细胞是一种先天免疫细胞，能够对病原体和其他各种异常信号进行响应，并通过MHC分子进行抗原递呈；单核细胞则以其强大的吞噬能力来清除受伤和衰老细胞；粒细胞具有吞噬和杀菌、参与肿瘤细胞的消灭并促进损伤组织的修复等作用。

本文使用SFLO全光谱流式细胞仪分析人外周血样本中的免疫细胞，对单核细胞、粒细胞和淋巴细胞的主要群体（T细胞、B细胞、NK细胞、DC细胞）进行精细分型。SFLO全光谱流式细胞仪拥有丰富的荧光采集能力和强大的算法，精确解析光谱，可避免荧光重叠度高的光谱干扰，实现更多参数更高水平更高质量的检测分析。

SFLO全光谱流式细胞仪（三激光）

激光器：405nm、488nm、635nm

（1）逻辑圈门

此panel从SSC和CD45图中圈出淋巴细胞门和单核细胞门以及粒细胞门，如图1所示，淋巴细胞门可以根据CD3、TCRγ/δ的表达区分出T细胞（T cells）、γδ T细胞和非T细胞（Non T）。T细胞进一步通过CD4和CD8标志物的表征，可以有效区分出CD4+T细胞、Treg细胞、CD8+T细胞。CD4+T细胞和CD8+T细胞可进一步根据CD197 /CD45RA /CD27 /CD38 /CD95 /HLA-DR /CD28 /CD279的表达量不同区分为多个细胞群。此外，根据T细胞中CD8和CD56的表达还可以区分出NKT细胞。

从非T细胞群体中，根据CD19和CD1c的表达区分出B细胞和Non T/B，B细胞可根据CD10、CD27和IgD、CD38的表达区为多个细胞群。从Non T/B细胞群体中，根据CD16和CD56区分出NK细胞和Non T/B/NK，NK细胞根据CD57的表达可以分为Late NK和Early NK。从Non T/B/NK中，根据CD11c、CD11b、CD38、CD123、HLA-DR的表达，区分出多个DC细胞亚群。

（2）高维分析

FlowSOM聚类生成的热图全面展示了淋巴细胞亚群中各个marker的表达情况，通过颜色的深浅直观地表示各个marker的强弱表达情况，颜色越亮，marker表达越强。

通过tSNE降维聚类，自动识别出28个细胞亚群，使用不同颜色进行标记区分，并在一张图中全部呈现，与手动圈门结果一致。

金年会金字招牌信誉至上医学SFLO全光谱流式细胞仪可以在多色检测的同时，无需考虑通道之间的干扰，实现对细胞群体的精准免疫分型，分析细胞亚群之间的功能联系，以及对于大量样品进行高通量检测，适用于多种应用场景，为不同的研究需求提供强有力的工具。