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    SFLO全光谱流式应用方案: 人外周血TBMNK细胞亚群分型
    • 金年会金字招牌信誉至上医学 更新时间:

      2024-10-15

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    人外周血免疫细胞亚群

    人体免疫系统中存在大量的免疫细胞,它们能够精准识别并杀伤病毒、细菌等外来入侵者,并执行免疫监视功能,发现和清除体内出现的突变或衰老细胞,维持机体内环境的稳定,保障身体健康。通过流式细胞仪对血液中的免疫细胞进行分析,有助于进行疾病诊断,准确评估免疫功能。

    本文使用SFLO全光谱流式细胞仪分析人外周血样本中的免疫细胞,对单核细胞和淋巴细胞的三个主要群体:T细胞、B细胞、NK细胞进行精确分型,并进一步鉴定出单核细胞的亚群(经典单核和非经典单核)和CD4+ T细胞、CD8+ T细胞、NKT细胞等T细胞亚群。在人体内,T细胞介导细胞免疫以杀伤入侵的病原体,B细胞能通过产生抗体发挥特异性体液免疫功能,NK细胞发挥着重要的抗肿瘤、抗病毒感染的作用,单核细胞则以其强大的吞噬能力来清除受伤和衰老细胞。金年会金字招牌信誉至上医学 SFLO全光谱流式细胞仪拥有丰富的荧光采集能力和强大的算法,精确解析光谱,可避免荧光重叠度高的光谱干扰,实现更多参数更高水平更高灵敏度的检测分析。

    应用方案


    仪器配置


    SFLO全光谱流式细胞仪(三激光)

    激光器:405nm、488nm、635nm


    Panel  I(三激光8色)设计



    逻辑圈门


    此panel从SSC/CD45 图中圈出淋巴细胞门和单核细胞门(未展示)开始分析,如图1所示,淋巴细胞门可以根据CD3、CD19的表达区分出T细胞、B细胞和非T/B细胞(Non T B),CD3+CD19-的细胞群为T细胞,CD19+CD3-的细胞群为B细胞,CD3-CD19-的细胞群为非T/B细胞。T细胞进一步通过CD4和CD8标志物的表征,可以有效区分出CD4T细胞、CD8T细胞以及DNT细胞(CD4-CD8T细胞)。非T/B细胞进一步通过CD16和CD56可区分出NK细胞(CD16+或CD56+)。淋巴细胞门也可以根据CD3和CD56的表达区分出CD3+CD56+的NKT细胞。如图2所示,单核细胞门可根据CD14和CD16的表达来区分经典单核细胞(CD14+CD16-)和非经典单核细胞(CD14-CD16+)。


    淋巴细胞圈门


    ▲ 图1.淋巴细胞圈门策略

    Panel II(三激光11色)设计



    逻辑圈门

    此panel从SSC/CD45图中圈出淋巴细胞门和单核细胞门(未展示)开始分析,如图3所示,淋巴细胞门可以根据CD3、CD19的表达区分出T细胞、B细胞和非T/B细胞(Non T B),CD3+CD19-的细胞群为T细胞,CD19+CD3-的细胞群为B细胞,CD3-CD19-的细胞群为非T/B细胞。T细胞进一步通过CD4和CD8标志物的表征,可以有效区分出CD4T细胞、CD8T细胞以及DNT细胞(CD4-CD8T细胞),CD4T细胞和CD8T细胞可进一步根据CD27/CD45RA的表达量不同区分为多个细胞群。图中还可以看出CD196在B细胞中的表达量非常高。非T/B细胞可通过CD16和CD56可区分出NK细胞(CD16+或CD56+)。如图4所示,单核细胞门可根据CD14和CD16的表达来区分经典单核细胞(CD14+CD16-)和非经典单核细胞(CD14-CD16+)。


    淋巴细胞圈门

    ▲ 图3.淋巴细胞圈门策略


    单核细胞圈门

    ▲ 图4.单核细胞圈门策略




    金年会金字招牌信誉至上医学SFLO全光谱流式细胞仪可以在多色检测的同时,无需考虑通道之间的干扰,实现对细胞群体的精准免疫分型,分析细胞亚群之间的功能联系,以及对于大量样品进行高通量检测,适用于多种科研及临床场景,为不同的研究需求提供强有力的工具,在免疫、血液病、癌症研究、感染免疫研究等多个领域有着广泛的应用前景。

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