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临床上常用流式细胞术对外周血中的不同群体的淋巴细胞进行鉴别和计数，比如CD3+T淋巴细胞，CD3+CD4+辅助/诱导T淋巴细胞，CD3+CD8+抑制/杀伤T淋巴细胞，CD3-CD19+B淋巴细胞，CD3-（CD16+CD56）+NK淋巴细胞，简称为TBNK。在人体内，T细胞介导细胞免疫以杀伤入侵的病原体，B细胞能通过产生抗体发挥特异性体液免疫功能，NK细胞发挥着重要的抗肿瘤、抗病毒感染的作用。通过对淋巴细胞的分群，有助于进行疾病诊断，准确评估免疫功能。

※ 模拟概念图

最新发布的《淋巴细胞亚群检测在血液肿瘤中应用的专家共识》中，在传统TBNK的基础上，增加了Treg的表染检测，并统称为淋巴细胞亚群。Treg在多种血液肿瘤中比例增加，可以通过抑制免疫细胞杀伤作用来帮助肿瘤细胞逃脱免疫监视，并且与恶性程度、转移倾向、复发率等预后指标密切相关。

人外周血TBNK+Treg淋巴细胞亚群分型（蓝激光8色）方案标志物如下表所示，方案中包括了白细胞、总T细胞、CD4+ T细胞、Treg细胞、CD8+ T细胞、B细胞、NK细胞亚群的特征标志物。 

如图1所示，此panel通过FSC-A/H去除粘连细胞，在SSC/CD45图中圈出SSCloCD45++的淋巴细胞门进行分析，淋巴细胞可以根据CD3表达区分出T细胞、非T（Non T），非T细胞群可以根据CD19、CD16和CD56的表达，分为B细胞和NK细胞。T细胞进一步通过CD4和CD8标志物的表征，可以有效区分出CD4+T细胞、CD8+T细胞。CD4+ T细胞亚群中，根据CD25和CD127的表达，区分出Treg细胞。

本文使用SFLO全光谱流式细胞仪，在488 nm蓝色单激光配置下检测人外周血样本中的TBNK和Treg淋巴细胞亚群，实现了在传统荧光流式细胞仪上需要2 - 3激光配置下才能检测的8色方案。